PCR与qPCR的差别，你知道吗？

PCR英文全名为Polymerase Chain Reaction，中文名为聚合酶链式反应，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。

每一个生命个体都有它的特异性DNA序列，通过检测样本中是否含有特异性DNA序列，来判定是否有特异性目标的存在。

PCR技术可以将特异性DNA序列进行循环扩增至N倍，即使再少量也能被检测出来。

无论是千万年前化石中的古生物，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出DNA，就能利用PCR将其扩增，进行比对。这就是为什么在诸多刑事剧中，经常可以看到通过检测DNA抓获真凶的桥段。

此技术自问世以来，在分子诊断、亲子鉴定、犯罪调查等方面发挥了巨大作用。

PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。

而在宠物医疗领域，PCR以病毒检测为主，通过检测有无此种病毒的特异性DNA序列，进行阴性/阳性判断。因其技术特点，即使微量病毒也可被检测出来，确保结果的准确性。

qPCR即为实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或者荧光基团，在整个PCR过程中通过收集荧光信号实时监测每一个循环中扩增产物量的变化，最后通过标准曲线和CT值对样本进行定量分析。

在整个实时监测过程中，荧光信号强度会呈现出一条S型趋势，分为四个时期：基线期、指数扩增期、线性增长期、平台期。

兽丘分子诊断所有项目均采用qPCR技术，在报告中除阴性/阳性判定外，如阳性还会给出样本浓度定量数值。

犬呼吸道全面筛查报告

定量数值均为N*10的负八次方，低于1x10的负8次方（ug/uL)一律判定为阴性，因为此数值是这项检测技术的最低灵敏值。

qPCR特异性、灵敏度均更胜一筹，但其操作也具有一定的复杂性，实验中的每个步骤都可能对结果造成影响，因此，规范的操作对于结果的准确性具有很大的影响。

抛开设备的专业度，是否符合金标准、专业的人员、环境中是否存在污染、操作流程等也是检测中不可忽视的重要环节。

兽丘遵循核酸检测的金标准。

①同一份样本必须做三次（三重复），且结果一致才能出具报告。确保结果的准确、可追溯、可重复。

②阳性、阴性质控与样本同步上机。

Q：为什么阴性、阳性质控需要兼备？

同时上机，为结果的准确性更添一份保障。

自2018年成立至今，兽丘已建立起一套完整的标准操作流程，且检测项目全面：21项全面筛查套餐、51项单一病原检测、21项遗传基因检测、18项异宠病原检测及鸟类性别鉴定，尽力满足临床所需。

如您有检测需求，可自行注册小程序账号或致电客服热线400-085-5299进行咨询。